换一批猪传染性胃肠炎病毒NSP8蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位的初步鉴定
Preparation of Monoclonal Antibody and Preliminary Identification of Antigenic Epitope of NSP8 Protein in Porcine Transmissible Gastroenteritis Virus
摘要为鉴定猪传染性胃肠炎病毒(porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV) NSP8蛋白的抗原表位,本研究对GST-NSP8重组蛋白进行了原核表达,并用纯化后的重组蛋白免疫6周龄BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾脏,采用常规杂交瘤细胞融合方法,经3次亚克隆后制备了1株稳定分泌抗NSP8蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株.分泌的单克隆抗体亚类鉴定其重链为IgG1型,轻链为κ链;杂交瘤细胞培养上清的效价为1∶3 200.Westernblotting试验结果表明该单克隆抗体能识别原核及真核表达的NSP8重组蛋白.利用截短表达的方法对NSP8蛋白进行抗原表位的鉴定,初步确定了单克隆抗体针对的抗原表位序列为31SPQILKQLTKAFNIAKSDFEREASV55.本研究制备的单克隆抗体及对抗原表位的鉴定,为TGEV NSP8蛋白相关功能的研究奠定了基础.
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关键词
猪传染性胃肠炎病毒NSP8基因单克隆抗体抗原表位porcine transmissible gastroenteritis virusNSP8 genemonoclonal antibodyantigenic epitope
分类号
S858.28
栏目名称
DOI
10.16431/j.cnki.1671-7236.2015.02.019
发布时间
2016-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
黑龙江省高等学校科技创新团队项目（2011TD001）
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