K亚群禽白血病病毒gp85单因子血清的制备及其特异性鉴定
Preparation and Specific Identification of Single Factor Serum of Subgroup K Avian Leukosis Virus gp85
摘要为了制备一种快速特异性识别K亚群禽白血病病毒(ALV-K)的单因子血清,本试验将ALV-K接种DF1细胞,提取感染细胞DNA作为模板,PCR扩增1 005 bp ALV-K-gp85和510 bp ALV-K-gp85 (fragment)基因.将其正确的阅读框插入表达载体pET-28a(+)中,转化大肠杆菌BL21 (Rosetta)菌株中表达.将表达蛋白常规免疫昆明白小鼠制备抗血清.结果表明成功获得39.85和22.01 ku的重组融合蛋白,且具有良好的免疫原性.间接免疫荧光试验(IFA)结果表明两血清均可与ALV-K反应,而不与ALV-A、ALV-B和ALV-J反应.本试验首次研制获得能特异性识别ALV-K的单因子血清,为K亚群禽白血病的快速检测奠定了基础.
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