换一批犬细小病毒NY株VP2蛋白多克隆抗体的制备与鉴定
Preparation and Identification of Canine Parvovirus NY Strain VP2 Protein Polyclonal Antibody
摘要试验旨在制备犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)VP2蛋白多克隆抗体。构建 pET28a-CPV-VP2重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经 IPTG 诱导,SDS-PAGE 鉴定融合蛋白的表达,纯化目的蛋白与佐剂混合、乳化制备后作为免疫原,免疫家兔制备 VP2蛋白多克隆抗体；采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(immunoperoxidase monolayer assay,IPMA)检测抗体的免疫活性、抗体滴度、病毒滴度及中和活性。结果表明,重组 VP2蛋白(rVP2)以包涵体形式存在,分子质量约为72 ku；所制备的多克隆抗体滴度为1600倍,病毒滴度为107 TCID50/mL,中和效价为1∶2884,该抗体与体外培养的 CPV 呈特异性反应,CPV VP2蛋白的多克隆抗体免疫活性和特异性良好,且中和活性高,为CPV基因工程疫苗的研究和临床治疗奠定了基础。
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分类号
S852.65+5
栏目名称
DOI
10.16431/j.cnki.1671-7236.2016.07.001
发布时间
2016-08-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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