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不同浓度 Ca2＋对塔里木马鹿冻融精子体外获能及蛋白酪氨酸磷酸化的影响

Effect of Different Concentrations of Ca2+ on in vitro Capacitation and Protein Tyrosine Phosphorylation of Tarim Red Deer (Cervus elaphus yarkandensis) Frozen-thawed Sperm

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摘要为探讨不同浓度C a2＋对马鹿精子体外获能的影响，本研究以塔里木马鹿冻融精子为试验材料，将精子分别悬浮于含不同浓度Ca2＋（0、1.1、2.2、3.5、5.0 mmol／L）的台氏液（sp‐TALP液）中，在培养0、2、4 h时，采用金霉素（CTC）染色法评价精子获能状态，采用SDS‐PAGE分离精子膜蛋白，进行免疫印迹分析，检测酪氨酸磷酸化蛋白的表达水平。结果表明，Ca2＋浓度为1.1、2.2 mmol／L有利于精子活力的维持（P＜0.05），精子获能率极显著高于对照组和高浓度组（3.5、5.0 mmol／L ；P＜0.01），精子存活时间最长（P＜0.01），但高浓度Ca2＋（5.0 mmol／L ）对精子活力具有显著抑制作用（P＜0.05），精子获能率极显著低于低浓度组（P＜0.01），精子存活时间最短（P＜0.01）；另外，随着培养时间的推移精子发生酪氨酸磷酸化蛋白的表达水平有所不同，培养2、4 h时，1.1 mmol／L组精子蛋白磷酸化水平极显著高于其他各组（P＜0.01），高浓度Ca2＋（3.5、5.0 mmol／L）组酪氨酸磷酸化蛋白的表达水平极显著下降（P＜0.01）。结果表明，塔里木马鹿精子体外获能所需的适宜Ca2＋浓度为1.1 mmol／L ，且获能过程中C a2＋的存在是必要的。