换一批雌二醇单克隆抗体制备及间接竞争ELISA检测方法的建立
Preparation of Monoclonal Antibody and Establishment of Indirect Competitive ELISA of Estradiol
摘要为建立敏感、特异、快速的雌二醇(estradiol,E2)残留免疫检测方法,本研究利用雌二醇人工抗原(E2-BSA)免疫BALB/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术制备特异性雌二醇单克隆抗体,利用高效价、高特异性单克隆抗体建立间接竞争ELISA(icELISA)方法.结果显示,试验成功筛选获得一株稳定分泌抗雌二醇抗体的杂交瘤细胞株(3H3),抗体效价可达1∶320 000,利用3H3腹水抗体优化间接竞争icELISA反应条件,检测抗体的敏感度,ICs0为1.636 ng/mL,IC20～IC80线性范围为0.202～13.281 ng/mL.雌二醇腹水抗体与雌三醇、乙炔雌二醇的交叉反应率分别达0.31％和0.25％,而与雌酮、戊酸雌二醇、苯甲酸雌二醇、炔雌醚、己烯雌酚、壬基酚的交叉反应率均＜0.1％.结果表明,利用本研究制备的单克隆抗体建立雌二醇间接竞争ELISA检测方法,可满足食品中雌二醇残留高灵敏度的检测要求.
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分类号
S859.84
栏目名称
DOI
10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.10.038
发布时间
2017-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
浙江省公益性行业(农业)科研专项（2014C32046）
温州市公益性社会发展科技项目（S20150026）
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