换一批多重PCR结合基因芯片技术检测5种猪繁殖障碍性病毒病方法的研究
Research on Multiplex PCR Combined with DNA Microarray for Detecting Five Kinds of Reproductive Disease Virus
摘要为建立运用多重PCR和基因芯片技术同时检测5种猪繁殖障碍性病毒病的方法.本研究根据GenBank中登录的猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪日本乙型脑炎病毒(JEV)及猪圆环病毒2型(PCV2)的基因序列设计特异性引物与探针,制备相应的寡核苷酸芯片,检测了5种猪繁殖障碍性疾病病毒的标准毒株,并对16份临床样品进行检测.通过多重PCR扩增出带有荧光标记的5种病毒的特异性基因片段,并与固定有特异性探针的基因芯片杂交.结果 显示,本研究建立的多重PCR结合基因芯片检测方法特异性强、稳定性好,灵敏度可达102拷贝/μL.16份临床样品检测结果显示阳性率达87.5％(14/16).以上结果表明该方法特异性好、灵敏度高,可高效检测以上5种病毒,为其临床诊断及流行病学调查提供了有效的检测方法.
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