解冻稀释液中添加精浆对冻融猪精子品质的影响
Effect of Adding Seminal Plasma to the Thawing Diluent on the Quality of Frozen-thawed Boar Sperm
摘要[目的]探究冷冻前添加热休克蛋白A8 (heat shock protein A8,HSPA8)和解冻后添加不同浓度精浆(seminal plasma,SP)对冻融猪精子的影响.[方法]采用手握法采集长白猪精液,添加0.5 μμg/mL HSPA8到猪精液冷冻保护剂中进行细管分装,投入液氮中保存3周后进行解冻,解冻后添加不同浓度精浆(0、10%、30%和50%),对冻融后长白猪精子的运动能力、质膜完整性、顶体完整性、细胞凋亡、线粒体膜电位、鱼精蛋白缺乏及体外获能水平等进行评估.[结果]与对照组相比(无HSPA8和精浆),添加0.5 μg/mL HSPA8处理组(无精浆)的精子直线速度(VSL)、曲线速度(VCL)、平均路径速度(VAP)和前向性运动(STR)均显著提升(P<0.05),精子直线性运动(LIN)和运动的摆动性(WOB)均无显著差异(P>0.05);精子质量参数中活力、质膜完整性和顶体完整性均显著升高(P<0.05),细胞凋亡水平与线粒体膜电位均显著降低(P<0.05);精子鱼精蛋白缺失率显著降低(P<0.05);精子蛋白酪氨酸磷酸化水平显著提高(P<0.05).之后在解冻液中添加不同浓度的精浆,与添加0.5 μg/mL HSPA8处理组(无精浆)相比,精浆添加量达到50%时,精子VSL、VCL、VAP、LIN、STR和WOB均显著提升(P<0.05);精子活力、质膜完整性、顶体完整性和线粒体膜电位均显著提高(P<0.05),细胞凋亡水平显著降低(P<0.05);精子鱼精蛋白缺失率显著降低(P<0.05);精子蛋白酪氨酸磷酸化水平显著提高(P<0.05).[结论]在冷冻基础液中添加0.5 μg/mL HSPA8和解冻稀释液中添加50%精浆联合使用可以有效改善冻融精子质量,将会对猪精液的冷冻保存及商业化生产提供一定的参考.
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