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响应面法优化含活性肽CC34毕赤酵母重组菌冻干营养保护剂的研究

Optimization of Lyophilized Combination for Pichia pastoris Containing Active Peptide CC34 Recombinant with Response Surface Methodology

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摘要[目的]利用响应面分析法优化含活性肽CC34毕赤酵母重组菌的冻干营养保护剂组合配方.[方法]通过单因素试验,筛选脱脂乳粉、海藻糖、山梨醇和谷氨酸钠提高毕赤酵母重组菌存活率的最佳范围;利用Box-Behnken法建立毕赤酵母重组菌存活率回归方程,分析3种保护剂组合对菌体存活率的效应关系.[结果]脱脂乳粉浓度为10％时毕赤酵母重组菌冻干存活率最高,达到51.23％;海藻糖浓度为15％时冻干存活率最高,达到67.50％;山梨醇浓度为20％时冻干存活率最高,达到52.19％;谷氨酸钠浓度为3％时冻干存活率最高,达到36.92％.通过响应面法获得含活性肽CC34毕赤酵母重组菌冻干保护剂组合中脱脂乳粉、海藻糖、山梨醇的浓度分别为10.75％、15.70％、20.19％,通过最优模型预测毕赤酵母重组菌的存活率为77.00％,应用此最优保护剂组合进行冻干试验,菌体冻干存活率为78.98％.[结论]本试验通过响应面法优化了毕赤酵母重组菌复合冻干保护剂配方,在脱脂乳粉浓度为10.75％、海藻糖浓度为15.70％、山梨醇浓度为20.19％条件下,可获得较高的菌体冻干存活率(78.98％).该复合冻干保护剂可用于含活性肽CC34毕赤酵母重组菌的保存和后续试验研究.