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牦牛源链球菌的分离鉴定及耐药性分析

Isolation,Identification and Drug Resistance Analysis of Streptococcus from Yak

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摘要[目的]了解西藏拉萨地区牦牛链球菌的感染情况、致病性及其耐药性,为牦牛源链球菌的研究提供新的数据.[方法]对55份耗牛鼻拭子进行细菌分离培养、菌落形态观察、革兰氏染色镜检、生化鉴定、16S rRNA序列PCR扩增以鉴定分离菌的种属特性.通过人工感染试验小鼠评价分离菌的致病性,采用药敏纸片扩散法检测分离菌的耐药性.[结果]分离菌在血平板上长出灰白色、表面光滑的α溶血圆形菌落,革兰氏染色镜检呈链状排列的阳性球菌.分离菌可发酵葡萄糖、乳糖、海藻糖和山梨醇,不发酵麦芽糖和甘油,硝酸盐还原试验、靛基质试验、V-P试验和MR试验均呈阴性.经16S rRNA基因序列比对分析,确定有25株链球菌(Tibet-1～Tibet-25),检出率为45.46％(25/55),其中17株多动物链球菌,8株马链球菌.分离菌16S rRNA基因序列与NCBI上已发布的链球菌相似性在 97.04％～99.77％之间,其中 Tibet-1、Tibet-2、Tibet-3、Tibet-5、Tibet-9、Tibet-10、Tibet-11、Tibet-14、Tibet-15、Tibet-16、Tibet-17共11株耗牛源多动物链球菌与KM981770.1的相似性均在99％以上.分离的耗牛源链球菌可引起小鼠腹泻,对发病小鼠脏器进行增菌培养,均可分离到链球菌.药敏试验结果显示,分离菌株对多西环素、红霉素、青霉素共11种抗菌药敏感,对复方新诺明耐药.[结论]本研究分离了耗牛源多动物链球菌和耗牛源马链球菌,并对其致病性和耐药性进行相关分析,为该病的防控和治疗提供了参考依据.