抗缪勒氏管激素抑制山麻鸭卵泡发育分子机制的研究
Study on the Molecular Mechanism of Inhibition of Follicular Development in Shan-ma Ducks by Anti-Müllerian Hormone
摘要[目的]探究抗缪勒氏管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)抑制山麻鸭卵泡发育的分子调控机制.[方法]选取40只29周龄产蛋山麻鸭,随机分为4组:AMH1、AMH2、AMH3和对照组,AMH1、AMH2和AMH3组给予2、20和200 μg/d AMH多肽;对照组给予同等体积的生理盐水,整个试验持续21 d;每天记录产蛋量,在试验末采集卵巢和卵泡进行计数,称重计算卵巢指数,测定血清促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、孕酮(progesterone,P4)和雌二醇(estradiol,E2)水平,检测等级卵泡(F6)、小黄卵泡(SYF)和大白卵泡(LWF)中卵泡刺激素受体(FSHR)、促黄体生成素受体(LHR)、类固醇生成急性调节蛋白(StAR)、3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)、雌激素合成酶(CYP19A1)、生长分化因子9(GDF9)、骨形态发生蛋白15(BMP15)基因表达量,以及F6和SYF中StAR、GDF9蛋白表达水平.[结果]与对照组相比,AMH2和AMH3组的产蛋率显著下降(P<0.05),其中AMH3组对产蛋率的抑制作用最为明显;AMH1和AMH2组SYF和LWF数量显著上升(P<0.05),而卵巢指数和LYF数量没有明显变化,血清LH、P4和E2水平呈剂量依赖性下降,AMH3组对生殖激素抑制作用较明显,其中AMH3组LH水平显著下降(P<0.05).与对照组相比,在F6中,AMH2组GDF9基因和AMH1组BMP15基因表达水平显著上升(P<0.05);在SYF中,除AMH2组GDF9基因外,各试验组FSHR基因表达水平显著下降,GDF9和BMP15基因表达水平显著上升(P<0.05),AMH3组GDF9蛋白水平显著上升(P<0.05);在LWF中AMH2和AMH3组的GDF9和BMP15基因表达水平显著上升(P<0.05).给予外源性AMH对F6和LWF中CYP19A1、3β-HSD和StAR基因表达水平均无显著影响(P>0.05),在SYF中,AMH1、AMH2和AMH3组中CYP19A1、3β-HSD和StAR基因表达水平均显著低于对照组(除AMH2组的CYP19A1基因外,P<0.05);与对照组相比,给予外源性AMH对F6和SYF中StAR的蛋白水平均无显著影响(P>0.05).[结论]200 μg/d外源性AMH可显著抑制卵泡发育,主要通过抑制LH、P4 和E2的分泌,上调卵泡中GDF9和BMP15表达水平,下调FSHR和LHR以及影响类固醇激素合成通路关键因子的表达来影响卵泡发育.
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