羊源产酸克雷伯菌的分离鉴定及感染小鼠的转录组学研究

Isolation,Identification of Klebsiella oxytoca from Goat and Transcriptomics Study on Infected Mice

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摘要[目的]分离鉴定羊源产酸克雷伯菌,探讨产酸克雷伯菌对动物的致病机制.[方法]采集海南黑山羊肺脏组织样品进行细菌分离培养,通过生化试验及16S rRNA基因检测方法对分离株进行鉴定,并对分离菌进行药敏试验、小鼠致病性试验、RNA-Seq分析和差异表达基因(DEGs)分析.[结果]分离出1株革兰阴性短杆状细菌,胰蛋白胨大豆琼脂培养基上为光滑圆形的乳白色菌落.分离菌能分解葡萄糖、乳糖、蔗糖等几种碳水化合物,靛基质试验阳性.16S rRNA基因检测结果显示,分离株与已公布序列的相似性＞99％,鉴定该分离菌为产酸克雷伯菌,命名为KOHN1.药敏试验结果显示,分离菌KOHN1对青霉素、苯唑青霉素、氨苄青霉素、羧苄青霉素、头孢氨苄、麦迪霉素、万古霉素和克林霉素具有耐药性,而对于其余21种抗菌药敏感.分离菌KOHN1攻毒小鼠后,肺脏组织病理学切片观察到小鼠肺部充血、水肿和渗出等急性炎症.DEGs富集分析显示,炎症细胞因子和趋化因子的DEGs在小鼠肺脏中大量表达.[结论]本试验成功分离出1株产酸克雷伯菌,分离株对小鼠致病性较强,免疫反应通路在病菌侵染过程中发挥着重要作用.该研究结果为后续产酸克雷伯菌的临床预防、诊疗及药物研发提供了参考依据.