白来航鸡不同来源间充质干细胞的比较研究
Comparative Study on Different Sources of Mesenchymal Stem Cells from White Leghorn Chickens
摘要[目的]以禽类间充质干细胞(MSCs)为研究对象,探讨不同来源MSCs生物学特性上的差异及其临床应用潜力.[方法]培养白来航鸡4种不同组织器官骨髓(BM)、脂肪(AT)、脐带(UC)和脾脏(S)衍生的MSCs,通过实时荧光定量PCR技术检测细胞表面标记物的表达,采用细胞生长曲线观察种群倍增时间变化,利用噻唑蓝细胞毒性检测法(MTT)确定基质细胞衍生因子1(SDF-1)对不同来源MSCs的细胞毒性,并选用细胞小室检测MSCs体外迁移情况,通过蛋白质印迹法方法确定MSCs体外迁移影响因素,最后选用成骨分化和成脂分化观察不同来源MSCs的体外分化情况.[结果]不同来源的MSCs细胞形态基本一致;细胞表面标记物CD29、CD44、CD71、CD90和CD105等基因呈阳性表达;不同来源的MSCs表面标记物的相对表达量不同,CD29基因的相对表达量基本相同,CD44基因在AT-MSCs中的相对表达量显著高于BM-MSCs(P<0.05),CD71基因在UC-MSCs中的相对表达量显著低于BM-MSCs(P<0.05),CD90基因在UC-MSCs和S-MSCs中的相对表达量极显著低于BM-MSCs(P<0.01);CD105基因在S-MSCs中的相对表达量显著低于BM-MSCs(P<0.05).4种来源MSCs均有较好的体外生长潜力,其中S-MSCs生产潜伏期最长(40 h).4种来源MSCs均具有较强的体外迁移能力,S-MSCs中CXC趋化因子受体4(CXCR4)的低表达可能是导致其体外迁移效率较低的原因.4种来源的MSCs均具有体外成骨分化和成脂分化能力,其中BM-MSCs的成骨分化能力较强,S-MSCs的成脂分化能力较强.[结论]白来航鸡4种来源的组织器官均可衍生出MSCs,且均具有良好的体外增殖、体外迁移及体外分化能力.4种MSCs的生物学特性存在差异,具有不同的临床应用潜能,BM-MSCs的综合性能较优,S-MSCs的脂肪诱导分化方面优势明显.本研究加强了对禽类MSCs的了解,对MSCs治疗禽类相关疾病的研究及珍稀禽类的保护具有重要意义.
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