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鸭肠炎病毒与A型产气荚膜梭菌共感染鸭回肠代谢组学分析

Metabolomic Analysis of Ileum Co-infected with Duck Enteritis Virus and Clostridium perfringens Type A in Ducks

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摘要[目的]探究鸭肠炎病毒(DEV)和A型产气荚膜梭菌(CpA)共感染的致病机制.[方法]研究选取37日龄健康非免疫雏鸭,随机分为对照组与共感染组.共感染组鸭于每天早晚各进行1次灌胃,每次灌CpA菌液8 mL(1×108 CFU/mL),连续5 d,首次灌胃72 h后于腿部肌肉接种DEV-GZ株病毒液(0.2 mL/只,TCID50=3.16× 10-9 TCID50/0.1 mL),对照组接种灭菌生理盐水0.2 mL,观察鸭临床病变及回肠剖检病变,采用细菌分离鉴定和PCR等方法检测DEV和CpA共感染模型是否成功建立.采集感染90 h对照组与共感染组回肠,采用液相色谱-质谱联用(LC-MS)技术对对照组及共感染组感染90 h鸭回肠进行代谢组学检测,筛选并分析潜在的差异代谢物及相关信号通路.[结果]经检测确定成功构建了鸭DEV和CpA共感染模型.对照组与共感染组鸭回肠差异代谢物质共有36种,在正离子模式下共有16种差异代谢物质,主要为2'-脱氧肌苷、腐胺、8(z),11(z),14(z)-二十碳三烯酸、胞苷和1-油酰基外消旋甘油,在负离子模式下共有20种差异代谢物质,主要为油酸、花生四烯酸、11(z),14(z)-二十二碳二烯酸、二十二碳三烯酸和亚油酸;差异代谢物主要富集的代谢通路为10条,主要为色氨酸代谢、嘧啶代谢、嘌呤代谢等.[结论]11(z),14(z)-二十二碳二烯酸、二十二碳三烯酸和花生四烯酸可成为DEV和CpA共感染鸭回肠的敏感生物标记物,提示DEV与CpA共感染加剧雏鸭回肠炎症,色氨酸代谢通路提示DEV与CpA共感染鸭免疫力变化存在联系.本研究为阐明DEV与CpA感染的致病机制奠定基础.