抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌ATCC 700603的抗菌机制

Antimicrobial Mechanism of Antimicrobial Peptide LL-1 Against Klebsiella pneumoniae ATCC 700603

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摘要[目的]探明新抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)的抗菌效果和机制.[方法]测定抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),通过抑菌曲线评价抗菌肱LL-1对肺炎克雷伯菌的体外抗菌效果;通过检测碱性磷酸酶(ALP)、β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)、核酸、蛋白质的泄露,评价抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌细胞膜和细胞壁的影响;通过核酸凝胶电泳检测抗菌肽LL-1与肺炎克雷伯菌DNA的结合作用;通过扫描电子显微镜观察抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌菌体形态的影响.[结果]抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌具有良好的抗菌活性,MIC为50 μg/mL;抑菌曲线表明,抗菌肱LL-1对肺炎克雷伯菌具有生长抑制作用,且2 MIC的抗菌肽LL-1在6 h内能完全抑制肺炎克雷伯菌;抗菌肽LL-1能导致肺炎克雷伯菌的ALP和β-半乳糖苷酶发生泄漏,且1/4 MIC的抗菌肽LL-1即可导致其泄漏量极显著高于对照组(P＜0.01);核酸和蛋白质泄露的检测结果进一步证实抗菌肽LL-1能导致肺炎克雷伯菌胞内容物外流;此外抗菌肽LL-1还能与肺炎克雷伯菌DNA结合;扫描电子显微镜观察显示,抗菌肽LL-1会导致肺炎克雷伯菌表面变得粗糙、菌体变形等.[结论]抗菌肽LL-1能增加肺炎克雷伯菌细胞壁和细胞膜的通透性,并结合其DNA,从而发挥抗菌作用,本研究结果将为深入研究抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌的抗菌机制奠定基础.

作者连凯琪 ^[1] 王宇航 ^[2] 曾雅静 ^[2] 周玲玲 ^[3] 张元臣 ^[4] 张明亮 ^[3] 张改平 ^[5] 王双山 ^[3] 学术成果认领

作者单位安阳工学院生物与食品工程学院,安阳 455000;河南农业大学动物医学院,郑州 450046;河南省兽用生物制品研发与应用国际联合实验室,安阳 455000 ^[1] 安阳工学院生物与食品工程学院,安阳 455000 ^[2] 安阳工学院生物与食品工程学院,安阳 455000;河南省兽用生物制品研发与应用国际联合实验室,安阳 455000 ^[3] 河南省太行山林业有害生物野外科学观测研究站,林州 456550 ^[4] 河南农业大学动物医学院,郑州 450046 ^[5]

关键词抗菌肽肺炎克雷伯菌抗菌机制细胞壁细胞膜 antimicrobial peptide Klebsiella pneumoniae antimicrobial mechanism cell wall cell membrane

分类号 S859.79

栏目名称 基础兽医

DOI 10.16431/j.cnki.1671-7236.2024.05.044

发布时间 2024-05-29

基金项目

国家自然科学基金 河南省科技攻关计划项目 安阳市重点研发与推广专项 安阳工学院博士后创新实践基地启动经费资助