摘要[目的]探究地菍总黄酮(TFMD)对糖尿病肾病(DN)小鼠体内铁死亡效应的抑制效果及其相关作用机制.[方法]利用肾小球足细胞(MPC5)进行体外试验,以高糖诱导的MPC5细胞建立体外DN模型.将细胞分为6个处理组:对照组(5.5 mmol/L葡萄糖)、DN模型组(60 mmol/L葡萄糖)、TFMD低(60 mmol/L葡萄糖+25μg/mL TFMD)、中(60 mmol/L 葡萄糖+50 μg/mL TFMD)、高(60 mmol/L 葡萄糖+100 μg/mL TFMD)剂量组以及铁死亡抑制剂组(Fer-1,60 mmol/L葡萄糖+2 μmol/L Fer-1).利用细胞毒性试验检测细胞活力,通过试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)活性及谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平,用DCFH-DA荧光探针法检测足细胞活性氧(ROS)水平.使用高脂饮食联合链脲佐菌素(STZ)构建小鼠DN模型进行体内试验,将60只小鼠分为6个处理组:对照组、DN模型组、二甲双胍阳性组(0.5 g/kg)及TFMD高(1.2 g/kg)、中(0.8 g/kg)、低(0.6 g/kg)剂量组,每组10只,检测各组小鼠尿微量白蛋白(MAU)、尿总蛋白(TUP)及血清尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)含量、SOD活性、GSH、MDA含量,同时检测血清和肾脏组织中铁离子含量;利用透射电镜观察肾脏组织中足细胞线粒体病理变化,并运用Western blotting检测各组小鼠肾脏组织中Nrf2、NQO1、GPX4蛋白表达量.[结果]体外试验结果显示,与对照组相比,DN模型组MPC5细胞存活率极显著降低(P＜0.01),细胞内MDA、ROS水平极显著上升(P＜0.01),GSH含量及SOD活性极显著下降(P＜0.01).与DN模型组相比,TFMD各剂量组及Fer-1组MPC5细胞存活率极显著升高(P＜0.01),细胞内MDA、ROS水平均极显著下降(P＜0.01),GSH含量、SOD活性极显著升高(P＜0.01).体内试验结果显示,与对照组相比,DN模型组小鼠MAU、TUP、SCr、BUN、MDA含量及血清和肾脏组织铁离子含量极显著升高(P＜0.01),血清SOD活性、GSH含量极显著降低(P＜0.01).与DN模型组相比,TFMD各剂量组小鼠MAU、TUP、SCr、BUN、MDA水平及血清和肾脏组织铁离子含量均极显著降低(P＜0.01),SOD活性和GSH水平极显著升高(P＜0.01).病理学观察结果显示,TFMD能改善足细胞线粒体相关病理损伤,不同程度改善线粒体形态.Western blotting结果显示,与对照组相比,DN模型组小鼠肾脏组织中Nrf2、NQO1、GPX4蛋白表达量极显著降低(P＜0.01).与DN模型组相比,TFMD各剂量组小鼠肾组织中Nrf2、NQO1、GPX4蛋白表达量极显著或显著升高(P＜0.01;P＜0.05).[结论]TFMD对小鼠DN的干预作用与调节机体铁代谢及改善机体脂质过氧化失衡相关,通过激活肾脏组织中Nrf2/NQO1/GPX4信号通路,从而抑制足细胞发生铁死亡.