野生动物源乳酸菌的分离鉴定及生物学特性研究
Isolation,Identification and Biological Characteristics of Lactic Acid Bacteria from Wild Animals
摘要[目的]乳酸菌是对人体、动物和植物有益的一类菌群,在食品工业、医药健康及农业领域中广泛应用,野生动物因其生存环境与畜禽和人类存在较大差异,其肠道内菌群也存在明显多样性.本试验旨在从野生动物粪便中分离乳酸菌,并分析其生物学特性及抑菌活性,以期获得微生物制剂的候选株.[方法]收集江苏某野生动物园内不同动物的570份粪便样本,用MRS选择培养基进行初筛,通过菌落形态观察、革兰染色镜检、生化鉴定等进一步进行乳酸菌鉴定,从中筛选出不溶血的分离株,用16S rRNA基因序列比对确定其种属,对分离株进行耐酸、耐胆盐、抑菌活性、药敏试验、自凝性和疏水性、动物安全性等一系列体外试验.[结果]从样本中分离得到40株疑似乳酸菌,其中3株有溶血现象,其余37株经16S rRNA基因鉴定后发现其可分属于包括融合魏斯氏菌、罗伊氏乳杆菌、唾液联合乳杆菌等在内的11个种属.经多项体外试验筛选后发现,分离株发酵乳杆菌ZX2性能突出,与其他分离株相比高度耐酸,可以直接在pH 3.0的MRS培养基中生长,且可耐受0.3%胆盐;对金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌有一定的体外抑菌能力,对D型产气荚膜梭菌G07和超级耐药大肠杆菌DJ2无抑菌能力;自凝性在5 h内可达16%,疏水性可达95%以上;对氯霉素、四环素、青霉素、氨苄西林、头孢唑林、氧氟沙星均存在一定敏感性;对小鼠无致病性.[结论]本研究在野生动物粪便中分离出37株乳酸菌,其中发酵乳杆菌ZX2具有良好的益生特性,肠道定植能力优良,可作为潜力益生菌菌株应用于开发微生态制剂.
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