摘要[目的]构建无量山乌骨鸡血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HMOX1)基因过表达载体,并转染鸡原代前脂肪细胞,探究过表达HMOX1基因对鸡原代前脂肪细胞增殖的影响.[方法]取1日龄无量山乌骨鸡雏鸡皮下脂肪组织,提取总RNA并反转录成cDNA,扩增HMOX1基因CDS区,使用质粒pcDNA3.1-mRFP构建过表达载体pc DNA3.1-HMOX1-mRFP,并进行酶切和测序鉴定;通过转染试剂将pcDNA3.1-HMOX1过表达载体转染鸡原代前脂肪细胞中并检测过表达效率;利用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期;利用实时荧光定量PCR和Western blotting检测增殖相关基因P21、CDK1、PCNA mRNA和蛋白表达量.[结果]酶切和测序结果表明,pcDNA3.1-HMOX1-mRFP过表达载体构建成功.实时荧光定量PCR和Western blotting检测结果显示,与对照组相比,转染pc DNA3.1-HMOX1-mRFP后细胞中HMOX1 基因mRNA和蛋白表达量均极显著上调(P<0.01),表明鸡原代前脂肪细胞中成功过表达HMOX1.CCK-8检测结果显示,与对照组相比,转染12 h时过表达HMOX1组细胞活力显著上升(P<0.05),转染36和48 h时细胞活力极显著下降(P<0.01).流式细胞术检测结果显示,与对照组相比,12 h时过表达HMOX1组S期的细胞数量极显著增加(P<0.01),G1期的细胞数量极显著降低(P<0.01);48 h时S期的细胞数量显著降低(P<0.05).增殖相关基因检测结果显示,两组间细胞中P21、CDK1 基因mRNA和蛋白表达量无显著差异(P>0.05);过表达HMOX1 组细胞中PCNA基因mRNA和蛋白表达量均显著低于对照组(P<0.05).[结论]本研究成功构建HMOX1基因过表达载体,转染无量山乌骨鸡原代前脂肪细胞后抑制了细胞增殖.试验结果可为进一步研究HMOX1对无量山乌骨鸡原代前脂肪细胞的分化作用提供理论指导.