摘要[目的]研究蛋鸡肠黏膜在经历损伤后对再次损伤的抵抗力是否增强,并探究其可能机制,为探索促进蛋鸡肠黏膜损伤修复的手段提供新视角.[方法]选取78羽7日龄海兰白雏鸡,分为13个处理组(每组6羽),随机选取6羽雏鸡腹腔注射PBS作为阴性对照组,记为1st NC组;另外72羽雏鸡采用腹腔注射脂多糖(LPS,10 mg/kg BW)诱导肠黏膜损伤,在注射后1、2、4、6、8、24 h分别随机选取6羽雏鸡处死并采样,记为1st Xhpi(hours post injection)组(X代表注射后的采样时间).在注射后48 h时,从注射LPS的雏鸡中随机选取6羽雏鸡腹腔注射PBS,作为第二阴性对照组,记为作2nd NC组(视同1st 48hpi组),剩余雏鸡第2次注射同剂量LPS.在第2次注射LPS后1、2、4、6、8 h分别随机选取6羽雏鸡处死并采样,分别记为2nd Xhpi组.所有组雏鸡采集血液、十二指肠组织并分离肠隐窝,分析其屏障功能、肠道干细胞(intestinal stem cells,ISCs)活性及隐窝微环境的变化.[结果]在LPS诱导损伤后,1st 4hpi组肠黏膜出现炎性细胞浸润、绒毛高度/隐窝深度比值下降、渗透性增加及黏液层厚度降低等损伤现象.注射后48 h,2nd NC组损伤程度减轻,屏障功能增强,表现为紧密连接Ocln基因表达量、杯状细胞密度、黏液层厚度及黏蛋白Muc2基因表达量均高于1st NC组.此时,进行第2次LPS诱导损伤,与2nd NC组相比,2nd 4hpi组肠黏膜的炎性细胞浸润程度与渗透性均未显著升高,但Claudin-1基因与补体蛋白C5基因表达量显著上调(P<0.05).ISCs分析结果显示,1st 4hpi组活跃态ISCs(active intestinal stem cells,aISCs)活性下降,之后逐渐恢复,在损伤后48 h恢复正常;2nd 4hpi组休眠态ISCs(reserve intestinal stem cells,rISCs)可快速激活并维持较高活性.肠隐窝分析结果显示,在2次损伤过程中,肠隐窝Notch信号通路均受抑制.[结论]在经历损伤修复后,肠黏膜屏障功能增强,肠隐窝局部Notch信号通路受到抑制,第2次损伤可快速激活rISCs,并促进ISCs向分泌型上皮细胞分化.