摘要[目的]探究芦丁对脂多糖(LPS)诱导的绵羊瘤胃上皮细胞屏障功能、炎症损伤的影响.[方法]体外培养绵羊瘤胃上皮细胞,用不同浓度LPS(0、1、5、10、50、100 μg/mL)刺激建立瘤胃上皮细胞损伤模型,确定LPS的最佳作用浓度和作用时间.以不同浓度芦丁(0、25、50、100、150 μg/mL)对瘤胃上皮细胞进行预处理,采用MTT法检测细胞活力,计算细胞相对增殖率,确定芦丁的适宜作用浓度和作用时间.基于筛选的LPS和芦丁作用浓度和时间进行细胞分组处理,分别为对照组(CON)、LPS组、芦丁组(R)以及芦丁干预组(R+LPS).利用ELISA试剂盒测定细胞上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-10含量;通过实时荧光定量PCR检测IL-1β、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、TNF-α、γ-干扰素(IFN-γ)、CXC趋化因子配体 8(CXCL8)、CXCL9、咬合蛋白(Occludin)、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、闭合蛋白-1(Claudin-1)、Claudin-4的mRNA相对表达量.[结果]通过试验筛选,最终确定1 μg/mL LPS作用9 h作为建立瘤胃上皮细胞损伤模型的最佳作用条件;100 μg/mL芦丁处理8 h作为芦丁在体外对瘤胃上皮细胞预保护的最佳作用条件.与CON组相比,LPS组细胞上清液中IL-1β、TNF-α含量均显著升高(P<0.05),IL-10含量显著降低(P<0.05).与LPS组相比,R+LPS组细胞上清液中IL-1β、TNF-α含量显著降低(P<0.05),IL-10含量显著升高(P<0.05).实时荧光定量PCR结果显示,与CON组相比,LPS组瘤胃上皮细胞中IL-1β、IL-6、IL-12、TNF-α、IFN-γ、CXCL8、CXCL9 mRNA表达量显著升高(P<0.05),IL-4、IL-10、Claudin-4、ZO-1 mRNA表达量显著降低(P<0.05).与LPS组相比,R+LPS组瘤胃上皮细胞中IL-1β、IL-6、IL-12、TNF-α、INF-γ、CXCL8、CXCL9 mRNA表达量显著降低(P<0.05),IL-4、IL-10、ZO-1、Claudin-4 mRNA表达量显著升高(P<0.05).[结论]本试验条件下,100 μg/mL芦丁作用8 h对LPS诱导的瘤胃上皮细胞屏障功能和炎症损伤具有明显的保护作用.