摘要[目的]视黄酸受体α(retinoic acid receptor alpha,RARα)在肌细胞增殖和分化进程中发挥着重要的作用.本研究旨在构建绵羊RARα慢病毒表达载体,并研究RARα基因在绵羊成肌细胞增殖过程中的调控作用.[方法]通过NCBI数据库获取绵羊RARα基因CDS序列(登录号:XM_004012862.6),采用基因合成方法插入到慢病毒转移载体(pCDH-CMV)克隆区,经PCR扩增及测序鉴定后,利用脂质体转染法将RARα慢病毒质粒转染人胚肾细胞(HEK 293FT),采用绿色荧光蛋白(GFP)、实时荧光定量PCR和Western blotting方法检测RARα基因和蛋白的表达水平;通过超速离心法收集RARα重组慢病毒颗粒,并感染绵羊成肌细胞,采用实时荧光定量PCR和Western blotting方法检测RARα、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子1A(p21)、增殖细胞核抗原(PCNA)、周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)和视黄酸受体相关孤儿受体(RORα)的表达情况,并通过细胞划痕和EdU检测分析RARα基因过表达对绵羊成肌细胞增殖的影响.[结果]绵羊RARα基因CDS序列成功插入pCDH-CMV克隆区,且RARα基因在HEK 293FT细胞中高表达.RARα重组慢病毒颗粒转染绵羊成肌细胞后,与对照组相比,RARα基因及其下游靶基因p21的表达量显著或极显著增加(P<0.05;P<0.01),且过表达RARα能够通过调控PCNA和CDK4的表达量极显著抑制成肌细胞增殖(P<0.01).RARα负调控RORα基因表达,提示二者在绵羊成肌细胞增殖过程中可能存在颉颃关系.[结论]本研究构建的RARα慢病毒表达载体感染绵羊成肌细胞后,能够通过降低PCNA和CDK4的表达量抑制细胞增殖,同时对RORα基因表达有显著抑制作用.本研究结果可为了解RARα基因在绵羊成肌细胞增殖过程中的分子机制提供依据.