新疆地区马乳和驼乳源粪肠球菌分离鉴定与耐药性分析
Isolation,Identification,and Drug Resistance Analysis of Enterococcus faecalis from Horse Milk and Camel Milk in Xinjiang
摘要[目的]了解新疆地区生鲜马乳和驼乳中粪肠球菌污染状况及耐药特性,为该地区食源性细菌和抗菌药物耐药性风险防控提供流行数据.[方法]采集新疆地区生鲜马乳32份和生鲜驼乳95份作为样本进行细菌分离培养,通过对分离菌革兰染色、生化鉴定、16S rDNA测序及构建系统发育进化树进行病原鉴定;利用微量肉汤稀释法对7类12种抗菌药物进行药敏试验;使用PCR方法检测相关7类32种关键耐药基因携带情况.[结果]共分离到26株粪肠球菌,总分离率20.5%(马乳50.0%、驼乳10.5%),所有分离菌株在血平板上均呈圆形凸起、光滑的灰白色或浅灰色菌落;革兰镜检呈紫色球状的革兰阳性菌.生化鉴定结果显示,所有分离菌株对触酶试验、阿拉伯糖、山梨糖、棉籽糖、鼠李糖、木糖呈阴性,对6.5%NaCl生长、七叶苷、吡咯烷酮芳基酰胺酶、精氨酸脱羧酶、甘露糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、葡萄糖、乳糖呈阳性.PCR扩增结果显示,所有分离菌株粪肠球菌特异性基因和16S rDNA扩增获得大小分别为941、1 476 bp目的条带.随机选取14株分离菌株的测序结果与NCBI中粪肠球菌序列相似性均>99.0%,综合判定所有分离菌株均为粪肠球菌.药敏试验结果显示,所有分离菌株对苯唑西林、头孢噻吩耐药率为100%,马乳分离菌对克林霉素耐药率为100%、驼乳分离菌对克林霉素耐药率为70%.耐药基因检测结果显示,检出率最高的为恶唑烷酮类耐药基因optrA(100%);blaCTX-M-123、blaSHV在马乳中分别为25.0%、12.5%,驼乳分离菌中均为40%;四环素类tetM、tetL、tetS在驼乳分离菌中检出率高于马乳分离菌;大环内酯类耐药基因中ermC仅见于马乳分离菌(6.25%),噁唑烷酮类耐药基因cfr仅见于马乳分离菌(6.25%).未检出linB、InuA、IsaA、sul1、sul2、sul3及floR基因.[结论]新疆地区生鲜马乳源较驼乳源中粪肠球菌的流行情况较严重,且均存在部分耐药现象.因此,对生鲜马乳与驼乳中粪肠球菌耐药性监测具有重要意义.
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