换一批Ficoll密度梯度离心法分离猪外周血单个核细胞条件的探讨
An exploration of the conditions for isolating peripheral blood mononuclear cells from pig's blood using Ficoll density gradient centrifugation
摘要目的 探讨猪外周血单个核细胞(PBMC)最佳分离条件,为寄生虫免疫学研究提供有效的方法.方法 使用猪淋巴细胞分离液,在不同离心转速和时间条件下分离猪PBMC,观察所得云雾状PBMC层的厚度,计算细胞得率及细胞活力,以确定猪淋巴细胞分离液分离猪PBMC的最佳实验条件.同时采用文献报道的人淋巴细胞分离液分离猪PBMC的分离条件(1 500 r/min,30 min)分离猪PBMC,比较两者分离PBMC效果.结果 使用猪淋巴细胞分离液(密度1.110 ng/L),在20～25 ℃室温下以1 500 r/min(半径15 cm)离心30 min,接着低温(4℃)1 500 r/min离心10 min,洗涤2次,这样获得的猪PBMC效果最好.同样条件下,用人的淋巴细胞分离液分离猪PBMC,不仅所得细胞沉淀中混杂细胞如红细胞及其他细胞碎片较多,而且PBMC细胞得率及活力也不好.结论 本实验提出了获得大量有活力的猪PBMC的方法和条件.
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