换一批SYBRGreenⅠ染料法定量PCR用于人体疟原虫定量检测及虫种鉴别的研究
Quantitative detection and species identificaton of human Plasmodium spp.by using SYBR Green Ⅰ based real-time PCR
摘要目的 建立一种可用于疟原虫检测并同时鉴别虫种的荧光定量PCR方法.方法 根据人体疟原虫18SrRNA基因序列特征,在疟原虫种特异性区域两侧的属特异性保守区设计引物,对4种人体疟原虫进行PCR扩增,将得到的扩增产物采用TA克隆法插入pGEM-T载体制备标准质粒,用于制备标准曲线进行定量分析,并进行熔解曲线分析,测定各虫种扩增产物的熔解温度.结果 4种人体疟原虫均能扩增得到特异性片断,荧光定量PCR方法中建立的标准曲线相关关系较好(相关系数r =-1.00),熔解曲线分析结果显示,4种人体疟原虫的熔解温度相差较大,分别为三日疟原虫71.3℃、恶性疟原虫72.8℃、卵形疟原虫74.6℃和间日疟原虫75.8℃.结论 建立的SYBR Green Ⅰ染料法荧光定量PCR技术可同时进行人体疟原虫的定量检测和虫种鉴别.
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分类号
R382.31（医学寄生虫学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1005-6661.2011.06.016
发布时间
2012-03-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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