广州管圆线虫感染小管福寿螺相关基因定量分析及α-tubulin基因组织表达分析
Quantitative analysis of gene expression in Pomacea canaliculata infected with Angiostrongylus cantonensis and α-tubulin gene expression in various tissues
摘要目的 探究小管福寿螺感染广州管圆线虫后部分基因表达情况,初步了解广州管圆线虫与其中间宿主小管福寿螺之间的相互作用关系,为防治广州管圆线虫病提供基础数据.方法 取含有广州管圆线虫Ⅰ期幼虫的大鼠粪便喂食福寿螺,分别于感染后1、10、20 d各取3~5只小管福寿螺,采集其血淋巴、肝胰腺、肾脏、肠道、头足和鳃组织,以未感染的小管福寿螺为空白对照组,提取不同感染时期小管福寿螺各组织总RNA,逆转录为cDNA.基于前期转录组测序结果,挑选10个涉及免疫防御、信号转导、细胞生长和代谢、应激反应等方面的基因,对小管福寿螺感染广州管圆线虫1、10、20 d的血淋巴进行基因荧光定量表达分析,并对α-微管蛋白(α-tubulin)基因在感染广州管圆线虫后的福寿螺肝胰腺、肾脏、头足部、肠道、鳃组织中的表达水平进行分析.结果 与空白对照组相比,CELA1基因在感染广州管圆线虫后1、10、20 d的福寿螺中表达量上调(t=12.32、23.51、34.92,P均<0.05),且表达量随感染时间延长而上升;GST基因表达量在感染后1 d为空白对照组的(7.26±1.80)倍,在感染后10、20 d表达水平低于空白对照组(t=23.89、19.83,P均<0.05);ferritin基因在感染后10 d较空白对照组显著上调(t=32.76,P<0.05).CRT基因表达水平在感染后1、10、20 d均较空白对照组上调(t=7.23、5.78、6.32,P均<0.05).α-tubulin基因在小管福寿螺肝胰腺组织中的表达水平最高(F=17.58,P<0.05);在小管福寿螺感染广州管圆线虫后,该基因在各组织中的表达量均有不同程度变化,其表达量以肝胰腺组织中下调最为明显(P均<0.05).结论 小管福寿螺感染广州管圆线虫后,血淋巴中多个基因表达水平发生改变,α-tu-bulin基因表达水平在多个组织中受到抑制.该研究为深入阐明小管福寿螺和广州管圆线虫的相互作用关系奠定了基础.
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