小鼠感染疟原虫后皮肤气味变化及对蚊虫吸引力的影响
Changes in murine skin odors following Plasmodium infections and their im-pact on mosquito attraction
摘要目的 探讨小鼠感染疟原虫后皮肤挥发性气味变化及对蚊虫吸引力的影响,并分析其皮肤表面菌群变化情况,为阐明病原体-宿主-虫媒三者相互作用以及虫媒病防控提供科学依据.方法 取20只6周龄雌性C57BL/6小鼠,随机分成感染组与对照组,每组10只.感染组每只小鼠经尾静脉注射1 x 106个约氏疟原虫,对照组注射等量磷酸盐缓冲液.于感染后1~6 d,每日从两组小鼠尾部静脉取血,制备血涂片镜检,以动态监测原虫血症变化情况.利用三笼蚊虫嗅觉行为分析仪,计数并比较两组小鼠吸引的斯氏按蚊数量.利用吸附物质收集两组小鼠皮肤挥发性气味,通过气相色谱-质谱联用技术鉴定气味分子,并比较两组小鼠皮肤各种气味分子释放量.此外,通过棉签拭子收集两组小鼠皮肤菌群并进行16SrRNA基因测序,比较两组小鼠皮肤菌群中各种细菌的相对丰度.结果 疟原虫感染后1~6d,感染组小鼠原虫率分别为0、(2.30±0.87)%、(8.00±4.34)%、(31.30±3.51)%、(42.00±2.65)%、(51.00±3.61)%,配子体率分别为0、(0.14±0.06)%、(0.39±0.10)%、(0.63±0.15)%、(1.10±0.10)%、(1.53±0.31)%,差异均有统计学意义(F=165.60、44.58,P均<0.001);两两比较结果显示,感染后6 d小鼠体内原虫率和配子体率均最高(P均<0.05);线性回归模型拟合结果表明,感染后小鼠体内原虫率(b=11.36,t=14.43,P<0.001)、配子体率(b=0.31,t=12.80,P<0.001)均呈上升趋势.感染当日及感染后1~6 d,感染组小鼠吸引蚊虫数量占比依次为50.45%(106/210)、49.55%(119/240)、49.18%(112/227)、55.87%(132/236)、66.84%(159/237)、61.32%(138/226)和 54.65%(126/230),呈增高趋势(x2=9.54,P<0.05).两组小鼠皮肤表面共鉴定出24种气味,其中感染组小鼠皮肤表面释放的对甲基酚(134 954.86±40 485.75 vs.34 700.13±4 774.68;t=4.260,P=0.013)、乙苯(1 214 980.59±111 546.49 vs.355 445.01±53 369.70;t=12.04,P=0.00)、壬醛含量(62 215.11±11 348.82 vs.24 040.15±8 557.10;t=4.35,P=0.02)均高于对照组,而甲苯(61 833.23±2 755.23 vs.152 906.21±10 199.69;t=14.93,P=0.00)、苯甲醛(583 921.81±39 764.63 vs.1 071 368.84±254 069.28;t=3.28,P=0.03)、吲哚含量(10 991.89±582.76 vs.27 275.57±3 995.59;=6.99,P=0.00)均低于对照组.感染组小鼠皮肤表面链球菌(0.29±0.12 vs.0.12±0.09;t=2.54,P=0.03)、罗斯氏菌相对丰度(0.16±0.05 vs.0.04±0.06;t=3.52,P=0.01)均高于对照组,而乳球菌相对丰度(0.02±0.04 vs.0.27±0.20;t=2.73,P=0.03)低于对照组.结论 小鼠感染疟原虫后皮肤挥发性气味发生改变,对蚊虫吸引力增强,原因可能与皮肤菌群变化有关.
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