聚多巴胺激活的功能化外泌体调控心肌细胞氧化应激的实验研究
Experimental study on the regulation of oxidative stress in cardiomyocytes by polydopamine activated functional exosomes
摘要目的 探究聚多巴胺(PDA)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)分泌外泌体(exo)的产量及活性的影响,并评价聚多巴胺-外泌体(PDA-exo)调控心肌细胞(CM)氧化应激的效果.方法 利用流式细胞术对分离出的BMSCs进行表征;利用粒径分析(NTA)及扫描电子显微镜(SEM)对PDA颗粒进行表征;利用蛋白质免疫印迹实验(WB)、透射电子显微镜(TEM)以及NTA定量分析对exo及PDA-exo进行表征;利用体外模拟的CM氧化应激环境对PDA-exo进行效果验证,并通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、荧光显微镜、荧光染色技术对CM及活性氧(ROS)调控效果进行评价.以上实验于2024年6~11月在解放军总医院心血管外科实验室完成,样本分析于解放军军事医学科学院完成.结果 PDA纳米颗粒可以使BMSCs分泌更多高活性的exo(约提高1.5倍);与对照组相比,PDA-exo在体外模拟的氧化应激环境中,有效降低了 CM内的ROS水平(P<0.05),并有效提高了 CM的链接蛋白43(Cx43)及肌钙蛋白-T(c-TnT)的表达,降低了凋亡相关基因3(caspase-3)的表达,改善了 CM的活性与功能(P<0.05).结论 PDA纳米颗粒可以有效刺激BMSCs分泌更多高生物活性的exo,并且PDA-exo可以有效清除CM内的ROS,恢复CM活性与功能.
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