摘要目的 分析氧化应激过程中微小RNA34a(miR-34a)下调沉默信息调节因子1( SIRT1)在内皮祖细胞功能障碍中的机制. 方法 本实验采用不同浓度的过氧化氢( H2 O2 )处理内皮祖细胞,通过CCK-8检测细胞的存活率;运用化学合成的方法合成miR-34a模拟物、miR-34a抑制物及其各自对照组转染至内皮祖细胞后,并用500 μM H2 O2 刺激,用RT-PCR验证miR-34a表达水平,利用流式细胞仪检测H2 O2 刺激miR-34a诱导细胞凋亡情况,通过qRT-PCR方法和Western blot技术检测SIRT1中mRNA和蛋白的表达水平. 结果 CCK-8检测发现,细胞存活率随着H2 O2 浓度的增加而逐渐降低,呈现浓度依赖性;与不加H2 O2 相比,加入100、200、500和800 μM的H2 O2 细胞存活率分别为94% ± 2% 、85% ± 2% 、78% ± 2%和32% ± 1% ,差异具有统计学意义(F=16. 3,P<0. 001).H2O2 刺激内皮祖细胞后,转染miR-34a模拟物的表达水平高于其对照组( t=16. 0,P=0. 003),转染miR-34a抑制物的表达水平低于其对照组(t=53. 0,P=0. 000).通过细胞凋亡检测miR-34a模拟物组细胞凋亡率明显升高(t=30. 4,P<0. 001),miR-34a抑制物组细胞凋亡率明显降低(t=8. 7,P<0. 001). qRT-PCR结果显示,miR-34a模拟物组中的靶基因 SIRT1 相对表达量低于其对照组( t =87. 7,P<0. 001),miR-34a抑制物组中的靶基因 SIRT1 相对表达量高于其对照组( t =125. 0, P <0. 001). Western blot结果显示miR-34a的模拟物与其对照组相比,SIRT1蛋白表达量明显下降( t =4. 1,P=0. 014),而 miR-34a 的抑制物与其对照组相比, SIRT1 蛋白表达明显增高( t =7. 1, P =0. 002). 结论 在氧化应激状态下,使用miR-34a的模拟物及抑制物可以调节miR-34a的表达,改变SIRT1中蛋白的表达.内皮祖细胞功能障碍可能与miR-34a水平升高及其靶蛋白SIRT1的表达下降相关.