B型利钠肽对醛固酮诱导的肾小管上皮细胞中利钠肽受体A表达的影响及机制

Effect and mechanism of brain natriuretic peptide on aldosterone induced expression of natriuretic peptide receptor-A in renal tubular epithelial cells

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摘要目的研究B型利钠肽(BNP)对醛固酮(Ald)诱导的肾小管上皮细胞(RTEC)中利钠肽受体A(NPR-A)表达的影响,探寻肾脏发生BNP 抵抗的机制.方法将正常状态的RTEC按BNP刺激浓度依次分为 10-7 M BNP组、10-6 M BNP组和 10-5 M BNP 组;将Ald诱导的RTEC按BNP刺激浓度依次分为Ald+10-7 M BNP组、Ald+10-6 M BNP组和Ald+10-5 M BNP组.通过实时定量聚合酶链反应检测RTEC上NPR-A的转录水平,蛋白质印迹法、免疫荧光染色技术及质膜蛋白分离技术检测NPR-A的蛋白表达水平,酶联免疫吸附法检测环磷酸鸟苷(cGMP)含量.结果在正常RTEC中,随着BNP刺激浓度的升高,NPR-A的mRNA含量、蛋白表达量及cGMP含量均呈先增加后减少的趋势,高浓度BNP 会抑制NPR-A的基因转录和蛋白表达,降低cGMP 含量.在Ald诱导的RTEC中,随着BNP刺激浓度的升高,NPR-A的mRNA含量、蛋白表达量及cGMP含量均在轻微增加后急剧减少,高浓度BNP会明显抑制NPR-A的基因转录和蛋白表达,减少cGMP生成.当受到相同浓度BNP刺激时,Ald诱导的RTEC上NPR-A的转录水平及cGMP生成量均低于相应的正常RTEC.结论在正常/Ald诱导的RTEC中,胞膜和胞质上NPR-A的蛋白表达水平的变化趋势与总蛋白水平相一致,即呈先升后降的动态变化特点,高浓度BNP会下调NPR-A水平,减少cGMP 生成.心力衰竭时发生的BNP抵抗现象与肾脏 NPR-A的变化密切相关,RTEC纤维化可能是 BNP 抵抗的机制之一.