血液灌流器对硫酸吲哚酚吸附性能检测方法的比较
Comparative evaluation of the detection methods for indoxyl sulfate adsorption in hemoperfusion sys-tems
摘要目的 对比超高效液相色谱串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrome-try,LC-MS/MS)与紫外分光光度法(ultraviolet-visible spectroscopy,UV-Vis)在血液灌流器硫酸吲哚酚(indoxyl sulfate,IS)吸附性能检测中的适用性,明确不同浓度下吸附效率的影响规律.方法 LC-MS/MS法:采用乙腈沉淀蛋白处理含IS牛血浆,测定灌流前后IS浓度,建立0.085~1.308μg/ml线性模型(Y=36045.242X+763.841,R2=0.9987);UV-Vis法:检测含IS牛血清白蛋白溶液,建立3.75~120.00 μg/ml双线性模型(Y=77.337X-0.5316,R2=0.9977;Y=93.014X-0.4991,R2=0.9996);2种方法的精密度RSD<5%;回收率LC-MS/MS:86%~110%、UV-Vis:91%~110%.结果 LC-MS/MS:灵敏度高(LOQ=0.0212 μg/ml)、抗基质干扰强,适用于血浆样本的大批量检测;UV-Vis:适用于高浓度IS(>3.75 μg/ml)的快速筛查,但受蛋白结合干扰显著.吸附规律:IS低浓度时(<30 μg/ml),分子扩散动力不足,效率较低;高浓度时(>100μg/ml)时,吸附剂表面有效位点被占据,单位分子结合效率下降;IS浓度约为60μg/ml时,提供充足扩散动力,同时避免位点竞争,达到效率峰值.结论 LC-MS/MS可成为血液灌流器IS吸附性能的核心检测方法,为质量标准建立提供依据;UV-Vis限用于吸附剂开发阶段的高浓度样本初筛.本研究为临床治疗优化与行业标准化提供关键技术支撑.
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