生色底物连续速率法测定圆斑蝰蛇凝血因子X激活剂的活性
The activity determination of factor X activator from Vipera russelli by a enzyme rate method using chromogenic substrates
摘要目的:采用生色底物连续速率法测定凝血因子X激活剂的酶学活性.方法:将凝血因子X激活剂与凝血因子X及生色底物同时加入反应体系,以1 min为间隔时间,连续监测凝血因子Xa的生色底物Suc-Ile-Gly(γPip)Gly-Arg-pNA在405 nm波长下的吸收值变化.通过吸收值对时间平方作图所得直线的斜率,对凝血因子X激活剂的浓度进行线性回归从而测得供试品的活性.结果:该方法的线性范围为0.45~1.20 u·mL-1,凝血因子X激活剂制剂与溶液的板间精密度(n=4)分别为6.2%及6.8%,板内精密度(n=3)分别为1.5%和1.8%.结论:本方法进行凝血因子X激活剂的活性测定,快速、准确、重现性良好.
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