换一批
换一批单克隆抗体A在液体制剂中铰链区裂解位点的鉴定
Identification of cleavage site in hinge region of monoclonal antibody A in liquid formulation
摘要目的:对治疗性单克隆抗体A在液体制剂储存中发生裂解的位点进行鉴定.方法:单克隆抗体A在pH5.9以及pH6.5条件下,40℃保存1个月后,利用分子排阻色谱法(SEC)对产生的碎片进行分离收集,并用电喷雾-四级杆-飞行时间质谱进行分析,确定其裂解位点.结果:未经还原处理时,利用SEC法收集到的碎片相对分子质量为100 565.30,100 726.27和100 886.57 Da,经还原处理后,测得的相对分子质量为23 500.80,26 623.75,26 785.96,26 943.65,50 448.09,50 609.62和50 766.90 Da.上述结果显示,发生裂解的位点为重链铰链区224位赖氨酸以及225位苏氨酸.结论:单克隆抗体A在溶液中发生裂解的位点是铰链区赖氨酸以及苏氨酸之间,该降解现象可通过降低贮存溶液的pH值得到控制.
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