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淫羊藿醇提物体外对乙型肝炎病毒抑制作用及机制探析

Inhibitory effect and mechanism of Epimedii Folium ethanol extract on hepatitis B virus in vitro

摘要目的:基于体外实验和网络药理学方法探究淫羊藿(epimedii folium,EF)醇提物对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)的抑制作用及潜在机制.方法:使用EF醇提物处理野生型HBV稳定复制细胞系HepG 2.2.15细胞,采用CCK8法进行药物毒性评价;应用PCR-荧光探针"一管法"、ELISA法检测乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎E抗原(HBeAg)水平,计算抑制率;利用TCMSP,GeneCards数据库筛选EF主要活性成分及HBV相关靶点,借助Cytoscape软件构建药物-活性成分-潜在疾病靶点网络,对核心靶点运用DAVID数据库进行GO和KEGG富集分析.结果:EF醇提物单独用药对HepG 2.2.15细胞的半数毒性浓度(CC50)值为1.21 mg·mL-1;对HBV DNA最大抑制率为59.54%,对HBsAg和HBeAg最大抑制率分别为63.07%和45.73%(P<0.05);对照药替诺福韦酯(tenofovir disoprox-il fumarate,TDF)对HBsAg和HBeAg均未见明显抑制作用(抑制率<20.00%).EF醇提物联合TDF对HBV DNA的最大抑制率为93.66%,对HBsAg和HBeAg的最大抑制率分别为54.97%和61.28%(P<0.05).通过网络药理学分析共筛选出EF 23个候选活性成分及104个治疗HBV潜在靶点;GO富集分析得到624个条目,包括生物过程442个、细胞组分73个、分子功能109个;KEGG分析主要聚集在癌症通路、PI3 K-Akt、脂质与动脉粥样硬化、人类乳头瘤病毒感染、乙型肝炎等信号通路.结论:EF可有效抑制野生型HBV复制,和TDF联合用药有协同抑制作用,尤其对抗原抑制效果显著;EF抗HBV具有多成分多靶点的作用特点,预测可以通过多条信号通路发挥作用,为后续深入探讨EF治疗HBV感染作用机制提供了理论基础.

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作者 郑艳芳 [1] 赵旭 [2] 曹梦珍 [2] 葛斐林 [2] 思兰兰 [3] 李乐 [3] 王伽伯 [2] 刘妍 [3] 肖小河 [1] 学术成果认领
作者单位 福建中医药大学药学院,福州350122;中国人民解放军总医院第五医学中心肝病医学部研究所,北京100039 [1] 中国人民解放军总医院第五医学中心肝病医学部研究所,北京100039 [2] 中国人民解放军总医院第五医学中心感染病医学部研究所,北京100039 [3]
分类号 R965
栏目名称 实验研究
DOI 10.3969/j.issn.1003-3734.2023.14.012
发布时间 2023-08-29
基金项目
国家自然科学基金 国家自然科学基金
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中国新药杂志

中国新药杂志

2023年32卷14期

1458-1466页

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