摘要目的:表皮葡萄球菌及其生物膜的耐药性已成为临床工作中的棘手难题,新型抗菌药物的挖掘可为临床相关感染性疾病的治疗提供突破口.本研究探讨新型小分子化合物L007-0069 对表皮葡萄球菌的抗菌活性,并进一步阐明其作用机制.方法:通过纸片扩散实验和微量肉汤稀释实验检测L007-0069 对表皮葡萄球菌的体外抑菌活性;采用时间-杀菌曲线研究L007-0069 对表皮葡萄球菌及其持留菌的杀菌活性;棋盘稀释实验用于评估L007-0069 与庆大霉素的联合用药效果;二甲氧唑黄实验用于检测L007-0069 对表皮葡萄球菌生物膜的抗菌作用;通过SYTO9/PI双荧光染色观察L007-0069 对表皮葡萄球菌生物膜结构的破坏作用;通过DiSC3(5)和SYTOX Green荧光探针检测L007-0069 对表皮葡萄球菌细胞膜完整性的破坏作用;最后通过小鼠皮肤脓肿模型,研究L007-0069 对表皮葡萄球菌的体内抗菌效果.结果:L007-0069 对表皮葡萄球菌RP62A和ATCC 12228 的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度均为4μg·mL-1,其对临床菌株也具有良好的敏感性.L007-0069 具有一定的时间和浓度依赖性杀菌活性;纸片扩散实验提示,与未加药的对照组抑菌圈(0.000±0.000)相比,80 μg 的 L007-0069 表现出明显的抑菌圈(9.267±1.201)mm(q=16.631,P<0.0001),且抑菌圈直径随着L007-0069 药量增加而扩大.L007-0069 与庆大霉素联用具有协同抗菌活性,其协同抑菌指数为0.5.此外,当L007-0069 的浓度为 4μg·mL-1 时可显著抑制表皮葡萄球菌生物膜的形成,使570 nm处的吸光度(A570)从(0.896±0.167)减少到(0.049±0.019)(q=5.551,P=0.0004).同时,4μg·mL-1 的L007-0069 还可有效破坏已形成的生物膜,使A570 从(1.367±0.198)减少到(0.237±0.072)(q=10.03,P<0.0001).通过激光共聚焦显微镜观察,L007-0069 可显著破坏生物膜的三维结构,使生物膜的总量显著减少.DiSC3(5)荧光探针实验提示L007-0069 在1/2×MIC浓度下能够显著提高细菌细胞膜电位的荧光强度.此外,SYTOX Green荧光探针实验结果表明,1/2×MIC浓度的L007-0069 能显著增加表皮葡萄球菌的SYTOX Green荧光强度且该效应呈浓度依赖性,进一步验证了其对细胞膜的破坏作用.动物体内模型提示,L007-0069 可显著降低脓肿组织活菌载量并降低炎症细胞浸润.结论:L007-0069可通过破坏表皮葡萄球菌细胞膜而发挥体外和体内抗菌作用,有望成为表皮葡萄球菌生物膜相关感染的替代治疗药物.