换一批高效液相色谱-荧光法测定小鼠脑组织中单胺递质及其相关物质
Determination of monoamine neurotransmitters and related substances in mouse brain tissue by HPLC-FLD
摘要建立高效液相色谱-荧光分析方法,研究小鼠脑皮层、海马、纹状体、丘脑等不同部位的单胺类神经递质及其相关物质.脑组织样本经高氯酸沉淀蛋白后进行色谱分析,采用Lichrospher C18柱(250 mm ×4.6 mm,5μm),流动相为pH3.06缓冲液(含1mmoVL庚烷磺酸钠;30 mmol/L磷酸二氢钠-磷酸溶液).甲醇(85:15);流速:1.0 mL/min;柱温:35℃.荧光检测:激发波长为280 nm,发射波长为315nm.采用建立的方法,鉴别出小鼠脑中存在去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)、酪氨酸、色氨酸、3,4-二羟苯乙酸和5-羟吲哚乙酸等物质;对NE、DA和5-HT进行定量研究,确定它们的线性范围分别为2.4～471.0 ns/mL(r=0.999 6),2.6～519.5ng/mL(r=0.999 4),2.4～469.3 n∥mL(r=0.999 1),日内、日间RSD均小于9.0%,准确度达到限度要求,提取回收率大于90%.本法专属性好,准确度高,可以反映不同鼠脑区域单胺类神经递质及相关物质含量上的差异.
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