换一批
换一批大黄酸通过非活性氧依赖性内质网应激通路诱导L-02细胞凋亡
Rhein induces apoptosis in L-02 cells via reactive oxygen species-independent endoplasmic reticulum stress pathway
摘要研究大黄酸对人正常肝细胞L-02的凋亡作用及探讨其机制.应用MTT法评价大黄酸对L-02细胞的活性抑制作用;流式细胞术检测大黄酸诱导L-02细胞的凋亡;DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)含量;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot技术检测细胞内质网应激相关基因和蛋白的表达变化;并探讨抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对内质网应激蛋白及caspase-4、caspase-3的影响.实验结果显示:大黄酸能够呈剂量和时间依赖性抑制L-02细胞活性,增加L-02细胞凋亡率;诱导细胞ROS水平增高,NAC预给药可显著降低其水平;大黄酸能显著上调L-02细胞内的葡萄糖调节蛋白78(GRP 78)、活化转录因子4(ATF-4)和C/EBP同源蛋白(CHOP)基因的mRNA水平;显著增加GRP 78,磷酸化c-jun氨基末端激酶(p-JNK),CHOP蛋白表达;NAC不能抑制大黄酸诱导的GRP 78,p-JNK,CHOP蛋白表达上调,亦不能抑制大黄酸诱导的caspase-4及caspase-3活性增加.表明大黄酸能够诱导L-02细胞凋亡,其作用机制与非活性氧依赖性的内质网应激通路有关.
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关键词
大黄酸L-02细胞细胞凋亡内质网应激活性氧rheinL-02 cellsapoptosisendoplasmic reticulum stressreactive oxygen species
主题词
大黄属(Rheum)活性氧(Reactive Oxygen Species)内质网应激(Endoplasmic Reticulum Stress)细胞凋亡(Apoptosis)细胞(Cells)
分类号
R965
栏目名称
论文
DOI
10.11665/j.issn.1000-5048.20160215
发布时间
2016-05-24
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