米诺环素对人脐静脉内皮细胞-单核细胞黏附的抑制作用及其机制研究

Study on Inhibitory Effects of Minocycline on HUVECs-lymphomonocyte Adhesion and Its Mechanism

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摘要目的:研究米诺环素(MC)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导内皮细胞-单核细胞黏附的抑制作用及其机制.方法:通过酶消化法从人脐带中获得原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs).将HUVECs细胞分为空白对照组、模型组和MC低、中、高剂量(1、10、100μmol/L)组,药物作用2 h后,除空白对照组外其余各组均加入10 ng/ml TNF-α诱导HUVECs与单核THP-1细胞的黏附,复制内皮细胞-单核细胞黏附模型.荧光显微镜观察黏附细胞数,荧光酶标仪测定其荧光强度;流式细胞仪检测细胞间黏附分子1 (ICAM-1)的表达;Western blot法检测细胞核及细胞浆转录因子(NF)-κB p65蛋白的表达.结果:与空白对照组比较,模型组黏附细胞数及其荧光强度、ICAM-1表达、细胞核NF-κB p65蛋白表达均增加,细胞浆NF-κB p65蛋白表达减弱,差异均有统计学意义(P<0.01).与模型组比较,MC低、中、高剂量组黏附细胞数及其荧光强度、ICAM-1表达均降低;MC中、高剂量组细胞核NF-κB p65蛋白表达减弱,细胞浆NF-κB p65蛋白表达增强,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05).结论:MC能显著地减少TNF-α诱导的内皮细胞-单核细胞的黏附,其机制可能与降低HUVECs细胞表面ICAM-1的表达、抑制NF-κB p65蛋白的表达有关.