HPSEC-ELSD法同时测定白及多糖的分子量和含量
Determination of Molecular Weight and Content of Bletilla striata Polysaccharide by HPSEC-ELSD
摘要目的:建立同时测定白及多糖的分子量及其含量的方法.方法:采用高效分子排阻色谱-蒸发光散射检测(HPSEC-ELSD)法.色谱柱为TSK-GEL G4000 PWXL,流动相为纯水,流速为0.6 mL/min,柱温为30℃,进样量为20 μL,采用蒸发光散射检测器.采用建立的方法测定3批白及多糖的分子量及其含量.结果:白及多糖的重均分子量测定线性范围为24.17~178.00 kD (R2=0.9855),BT07含量测定线性范围为0.5080~5.080 mg/mL(R2=0.9984),检测限、定量限分别为0.1165、0.2740 mg/mL,精密度、稳定性、重复性试验的RSD均<2%(n=6或n=7);白及多糖样品含量测定平均加样回收率为99.16%~100.20%(RSD=0.39%~0.64%,n=9).3批样品的平均保留时间为14.28 min(RSD=4.35%,n=3),平均重均分子量为23.54 kD(RSD=3.78%, n=3),多分散系数(D,MW/Mn)范围为1.463~1.578,样品平均含量为93.4%(RSD=4.22%,n=3).结论:建立的HPSEC-ELSD法操作简便、快速,结果准确可靠,可同时测定白及多糖的分子量和含量.
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