钩苞大丁草的HPLC指纹图谱建立及含量测定
Establishment of HPLC fingerprint and content determination of Gerbera delavayi
摘要目的 建立钩苞大丁草的指纹图谱及其11种成分的含量测定方法.方法 采用高效液相色谱(HPLC)法,根据《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》建立13批(编号S1~S13)钩苞大丁草的指纹图谱并进行相似度评价,同时进行共有峰指认;采用SPSS 25.0软件和SIMCA 14.1软件进行分层聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA);采用HPLC法测定样品中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、3,8-二羟基-4-甲氧基-5-羧基-香豆精、咖啡酸、3-羟基-4-甲氧基-5-羧基-香豆精、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、异绿原酸A、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、异绿原酸C、花椒毒素11种成分的含量.结果 13批钩苞大丁草的HPLC指纹图谱相似度为0.801~0.994;从中共标定了38个共有峰,并指认了其中13个共有峰.HCA、PCA结果均显示,S1~S5、S7聚为一类,S6聚为一类,S8聚为一类,S9、S11聚为一类,S10、S12~S13聚为一类;OPLS-DA结果显示,峰7(绿原酸)、峰21(异绿原酸A)、峰26(花椒毒素)、峰19(异绿原酸B)、峰33、峰13、峰23(异绿原酸C)、峰2(新绿原酸)、峰17(木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷)的变量重要性投影值均大于1.上述11种成分在各自检测质量浓度范围内线性关系均良好(r均大于0.999);精密度、重复性、稳定性试验的RSD均不大于2%(n均为6);平均加样回收率为92.54%~105.55%,RSD为0.83%~1.93%(n=6);平均含量分别为0.744、5.014、0.646、0.431、0.069、0.582、0.979、2.754、0.157、1.284、2.943 mg/g.结论 本研究建立的HPLC指纹图谱和含量测定方法简单、准确、稳定,可为钩苞大丁草药材的质量控制提供依据.花椒毒素、绿原酸、异绿原酸A、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、异绿原酸C、新绿原酸可作为钩苞大丁草药材的质量标志物.
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