枸杞多糖抑制口腔癌细胞增殖、迁移及免疫逃逸的机制研究
Study on the mechanism of Lycium barbarum polysaccharides inhibiting the proliferation,migration and immune escape of oral cancer cells
摘要目的 探索枸杞多糖调节T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(TIM3)/半乳糖凝集素9(Gal-9)信号通路对口腔癌细胞增殖、迁移和免疫逃逸的影响.方法 将人口腔癌KB、CAL27细胞分为对照组、低浓度枸杞多糖组(200 μg/mL)、高浓度枸杞多糖组(400 μg/mL)、pcDNA-NC组(转染pcDNA-NC质粒)、pcDNA-TIM3组(转染pcDNA-TIM3质粒)、高浓度枸杞多糖+pcDNA-NC组(400 μg/mL枸杞多糖+转染pcDNA-NC质粒)、高浓度枸杞多糖+pcDNA-TIM3组(400 μg/mL枸杞多糖+转染pcDNA-TIM3质粒).测定细胞的增殖、迁移、侵袭能力,T细胞杀伤率,细胞上清液中干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素2(IL-2)水平,以及细胞中TIM3、Gal-9 mRNA表达,以及细胞中吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)、程序性死亡受体配体1(PD-L1)、TIM3、Gal-9蛋白表达.结果 与对照组比较,低、高浓度枸杞多糖组2种细胞的克隆形成率、划痕愈合率、侵袭细胞数以及IDO1、PD-L1蛋白和TIM3、Gal-9 mRNA及其蛋白表达水平均显著降低/减少(P<0.05),增殖抑制率、T细胞杀伤率和IFN-γ、IL-2水平均显著升高(P<0.05);与对照组、pcDNA-NC组比较,pcDNA-TIM3组2种细胞的克隆形成率、划痕愈合率、侵袭细胞数以及IDO1、PD-L1蛋白和TIM3、Gal-9 mRNA及其蛋白表达水平均显著升高/增加(P<0.05),增殖抑制率、T细胞杀伤率和IFN-γ、IL-2水平均显著降低(P<0.05);与高浓度枸杞多糖组、高浓度枸杞多糖+pcDNA-NC组比较,高浓度枸杞多糖+pcDNA-TIM3组2种细胞的克隆形成率、划痕愈合率、侵袭细胞数以及IDO1、PD-L1蛋白和TIM3、Gal-9 mRNA及其蛋白表达水平均显著升高/增加(P<0.05),增殖抑制率、T细胞杀伤率和IFN-γ、IL-2水平均显著降低(P<0.05).结论 枸杞多糖可能通过抑制TIM3/Gal-9信号通路来抑制口腔癌细胞增殖、迁移和免疫逃逸.
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