复方蜥蜴散诱导细胞凋亡及自噬性死亡逆转胃癌顺铂耐药的机制研究
Study on the mechanism of Compound lizard powder on reversing cisplatin resistance in gastric cancer by inducing apoptosis and autophagic death
摘要目的 研究复方蜥蜴散通过核因子κB(NF-κB)/SNAIL信号通路逆转顺铂(DDP)耐药性胃癌细胞MKN45/DDP的耐药机制.方法 将MKN45/DDP细胞分为模型组(20%正常大鼠血清)、DDP组(1.3 μg/mL DDP+20%胎牛血清)及复方蜥蜴散低、高剂量含药血清+DDP组(17.2、68.8 g/kg复方蜥蜴散的20%含药血清+1.3 μg/mLDDP).测定MKN45/DDP细胞的生存活力、凋亡水平、自噬水平,检测细胞上清中微管相关蛋白1轻链3(LC3)含量,检测细胞中B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平以及磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)、SNAIL的蛋白表达水平;利用NF-κB通路激动剂肿瘤坏死因子α(TNF-α)进一步明确复方蜥蜴散改善DDP耐药性的分子机制.结果 与模型组及DDP组比较,复方蜥蜴散低、高剂量含药血清+DDP组细胞存活率均显著降低(P<0.05),凋亡及自噬水平均显著升高(P<0.05);细胞中Bcl-2(复方蜥蜴散低剂量含药血清+DDP组除外)、p-NF-κB p65、SNAIL蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),LC3含量和Bax蛋白表达水平均显著升高(P<0.05).复方蜥蜴散高剂量含药血清+DDP可有效逆转TNF-α诱导的耐药细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值下降及Bax蛋白表达下调(P<0.05).结论 复方蜥蜴散含药血清联合DDP可通过抑制NF-κB/SNAIL信号通路,诱导MKN45/DDP细胞凋亡及自噬性死亡,从而逆转该细胞的DDP耐药性.
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