换一批
换一批结核分枝杆菌ESAT-6 DNA疫苗的细胞和体液应答及保护效率研究
ESAT-6 DNA vaccine for Mycobacterium tuberculosis and its humoral and T-cell response as well as its protective efficacy
摘要构建了含分枝杆菌抗原ESAT-6(6 kDa)分泌蛋白(结构基因)的真核表达载体pJW4303,进行了酶切鉴定和序列分析,确定含有正确的读码框.用脂质体介导法将重组表达质粒导入COS7细胞内并瞬时表达,收集表达细胞或浓缩上清液,进行SDS-PAGE电泳,用结核杆菌特异性抗体进行免疫印迹检测,证明上述重组质粒能在哺乳动物细胞中表达出特异蛋白.重组表达质粒肌注免疫小鼠,首免后21 d,未检测到特异性抗体,二免和三免21 d后ESAT-6的特异性抗体平均效价分别为1:400和1:800.三免后21 d ESAT-6的特异性细胞因子γ-干扰素的浓度为12.8±0.4ng/mL,而阴性对照空载体DNA组三免后只诱导产生＜0.1 ng/mL的γ-干扰素.三免后经静脉强毒攻击,免疫组小鼠肺脏的细菌数比对照空载体组减少了90%以上.本研究表明,该核酸疫苗能同时诱导机体产生细胞和体液免疫应答并获得较高的保护效率.
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