换一批
换一批区别伪狂犬病病毒野毒株和gE-疫苗株的gE-MGB-TaqMan PCR方法的建立
A gE-MGB-TaqMan real-time PCR to differentiate pseudorabies virus gE gene detected vaccine strains from wild-type strains
摘要本实验通过设计针对伪狂犬病病毒gE基因的引物和MGB(Minor groove binder oligodeoxynucleotide conjugate,MGB-ODN)TaqMan探针,结合ABI PE7700荧光定量PCR仪器系统,建立了一种能区别伪狂犬病病毒野毒株和gE-疫苗株的快速检测方法gE-MGB-TaqMan PCR.实验表明,该方法可检测出最低43拷贝的gE基因和104倍稀释的伪狂犬病病毒Fa株DNA,与微量血清中和结合MTT比色法相比,灵敏度和特异性一致,检测时间仅为后者的1/10,操作比后者更为简单.特异性和重复性试验表明:gE-MGB-TaqMan PCR特异性和重复性好.该方法以闭管的模式操作,减少了各步骤污染的可能性,整个检测少于3 h.
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