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牛瑟氏泰勒虫环介导等温扩增检测方法的建立

Development of LAMP for detection of Theileria sergenti

摘要为建立快捷、灵敏的牛瑟氏泰勒虫(T.sergenti)检测方法,本研究以感染牛T.sergenti的阳性血液为试验材料,建立了牛T.sergenti P33表面蛋白基因环介导等温扩增(LAMP)检测技术,并优化了LAMP的各反应条件,进行了敏感性和特异性试验.结果显示,扩增产物经显色、电泳、酶切鉴定后,LAMP方法扩增牛T.sergenti产物检测管显色后呈阳性反应,最低检测量为2.3 fg/μL模板DNA,比普通PCR高10倍,牛T.sergentiLAMP产物电泳后呈特征性梯状条带,而弓形虫等对照组均无扩增条带.说明本研究建立的LAMP方法具有灵敏、特异、快速等优点,适合于牛T.sergenti的检测.

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