换一批鸭坦布苏病毒抗体间接ELISA检测方法的建立
Establishment of an indirect ELISA for detection of antibody against duck Tembusu virus
摘要为建立快速检测鸭坦布苏病毒(DTV)的血清学方法,本研究利用纯化的DTV奉贤株(FX2010)作为包被抗原,建立了检测DTV血清抗体的间接ELISA方法,并且对各种检测条件进行了优化.优化后确定的抗原最适包被浓度为1.675 μg/孔,抗原最佳包被条件为37℃放置2h后,4℃下过夜,血清的最佳稀释度为1:200,酶标抗体最适稀释度为1∶2 000.在优化条件下,阴阳性临界值判定标准为0.432.用建立的间接ELISA方法对禽流感病毒、新城疫病毒、网状内皮增生病病毒、I型鸭肝炎病毒、呼肠孤病毒、禽白血病病毒阳性血清进行了检测,均无交叉反应,表明该方法具有良好的特异性.批内和批间重复试验的最大变异系数分别为2.9％和3.9％,显示该方法具有很好的稳定性.用间接ELISA方法对140份疑似鸭坦布苏病血清样品进行检测,有108份样品呈现阳性,而琼扩试验只有32份呈阳性结果,而且用该方法检测的阳性样品包括了琼扩试验的阳性样品,证明该方法具有较高的敏感性和特异性.本研究快速检测DTV抗体间接ELISA的建立为该病的诊断和流行病学调查提供了新的方法.
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分类号
S852.65
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1008-0589.2011.08.12
发布时间
2011-12-23
基金项目
农业部动物转基因专项（2009ZX08010-022B）；
公益性行业(农业)专项经费资助（201003012）
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