兔出血症病毒VP60抗原优势区和Th细胞表位融合蛋白的原核表达及免疫效力测定
Expression of dominant antigen regions of RHDV VP60 capsid fused with universal Th cell epitope and evaluation immune efficacy in rabbits
摘要为检测兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白VP60两个抗原优势区串联通用Th细胞表位的融合蛋白AB-Th的免疫效力,本研究采用融合PCR的方法以pBL-RHDV为模板扩增AB-Th基因并亚克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,转化大肠杆菌BL21 (DE3)菌株,大量表达AB-Th融合蛋白.结果显示,融合蛋白以包涵体形式表达,并且具有良好的免疫原性.使用纯化后的融合蛋白免疫实验兔,并分别利用ELISA方法和MTS法检测兔免疫后的抗体水平和淋巴细胞增殖能力.结果表明该融合蛋白能够使兔产生针对RHDV VP60蛋白的特异性抗体和导致高水平的淋巴细胞增殖,并能够为实验兔提供100%的保护.
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