基于DPO引物的空肠弯曲菌PCR检测方法的建立与初步应用
Development and preliminary application of DPO-based PCR method for detection of Campylobacter jejuni
摘要为建立特异、快速检测空肠弯曲菌的方法,本研究针对其gyrA基因设计了一对双启动寡核苷酸引物(DPO),建立了空肠弯曲菌DPO-PCR检测方法.试验结果显示,该方法的检测下限为1.2× 102 cfu/mL,在48℃~68℃退火温度范围内均可高效扩增靶基因片段,表明该方法退火温度范围宽,同时DPO引物特异性强,PCR反应过程中不会产生非特异性扩增.利用该方法对采集的184份样品进行检测,共计检出17份空肠弯曲菌阳性样品,经国标法(GB/T 4789.9-2008)复验,两者检测结果一致,显示了良好的实用性.该DPO-PCR方法设计简单、特异性强,为致病微生物的快速准确检测提供了新方法.
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