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肠致病性大肠杆菌DPO-PCR快速检测方法的建立

Development of a dual-priming oligonucleotide-based PCR assay for the rapid detection of enteropathogenic Escherichia coli

摘要为建立肠致病性大肠杆菌(EPEC)的快速检测方法,本研究以EPEC bfpA基因为靶基因设计了一对双启动寡核苷酸引物(DPO),建立了EPEC的DPO-PCR快速检测方法.结果显示,退火温度在45℃~65℃范围内均能够高效地扩增出目的基因,表明DPO引物对退火温度不敏感.该方法对其他菌株的扩增结果均为阴性,特异性强;其灵敏度为97 cfu/mL.利用该方法和国标法分别对采集的230份临床样品进行检测,均共计检出5份EPEC阳性样品,两者符合率为100%.本研究建立的DPO-PCR方法设计简单、特异性强、灵敏度高,具有良好的实用性,为快速准确检测EPEC提供新的检测手段.

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中国预防兽医学报

中国预防兽医学报

2015年37卷7期

541-544页

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