换一批摘要鸡毒支原体(MG)粘附蛋白是MG定植于宿主细胞表面的关键因子,并在MG致病过程中发挥着重要作用.为筛选并鉴定MG新的粘附蛋白,本研究根据生物信息学软件对MG S6基因组全部序列进行分析,选取了MG的一个假定膜蛋白基因,其大小为675 bp(编码225个氨基酸,分子量约25 ku,将其命名为P25).通过MG膜蛋白组分的提取及western blot鉴定,结果显示P25分布在MG膜的表面.利用PCR扩增MG p25基因并通过定点突变将其序列中TGA终止密码子突变为TGG(编码色氨酸),通过原核表达其编码的重组P25蛋白(rP25),并以rP25作为免疫原免疫兔子制备高免血清.激光共聚焦显微镜观察显示rP25和MG均对鸡胚成纤维细胞系(DF-1)具有明显的粘附作用,而ELISA和流式细胞仪检测结果则表明rP25和MG对DF-1细胞的粘附为特异性粘附,其中rP25抗血清可以明显抑制rP25和MG对DF-1细胞的粘附作用,从而证明P25为MG的一个粘附相关蛋白.
更多相关知识
关键词
鸡毒支原体DF-1细胞激光共聚焦ELISA流式细胞仪Mycoplasma gallisepticumDF-1 cellslaser confocal microscopeELISAflow cytometry
分类号
S852.62
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1008-0589.2016.02.05
发布时间
2016-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
- 浏览0
- 被引4
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
