延边地区牛病毒性腹泻病毒YBHC株的分离鉴定与遗传进化分析
Isolation and genetic evolution analysis of bovine viral diarrhea virus YBHC strain
摘要延边朝鲜族自治州地理位置特殊,边境畜产品贸易往来日见频繁,为了解延边地区牛病毒性腹泻病毒(BVDV)流行株情况,本研究采集延边州规模化养牛场疑似感染BVDV牛的粪便样品,经常规处理后接种MDBK细胞,盲传5代后观察细胞病变并经PCR鉴定,结果显示未出现BVDV典型的空泡病变,PCR扩增得到约300 bp与预期相符的目的条带,结合患牛临床症状初步判定为非细胞病变型(NCP型)BVDV.对5'UTR基因序列(OM622422)的扩增产物测序并进行遗传进化分析,结果显示分离株为BVDV-1b亚型,为NCP型,命名为YBHC株BVDV-1b.对鉴定为BVDV阳性的细胞培养并传至7代,收集细胞经磷钨酸负染后电镜观察,可见典型BVDV病毒粒子,大小为40 nm~60 nm.本研究首次对延边地区进行BVDV流行株的分离与鉴定,并得到病毒粒子,为BVD疫情防控和疫苗研制提供了物质基础和参考依据.
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