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多杀性巴氏杆菌脂多糖刺激羊支气管上皮细胞后的转录组测序与分析

Transcriptome sequencing and analysis of goat bronchial epithelial cells stimulated by Pasteurella multocida Lipopolysaccharide

摘要脂多糖(LPS)是多杀性巴氏杆菌(Pm)关键的毒力因子,在其致病机制中发挥重要作用.为了探究不同血清型Pm LPS对宿主细胞的致病机制,本实验将从D型和A型Pm中提取的LPS(D-LPS和A-LPS)分别以1 μg/mL刺激羊支气管上皮细胞6h后裂解各组细胞,采用Illumina HiSeq测序平台进行转录组测序,将测序数据处理后获得转录水平差异基因,利用GO和KEGG数据库对转录差异基因进行GO功能注释与KEGG富集分析,并利用RT-qPCR对转录组测序中的转录差异基因进行验证.结果显示:D-LPS组筛选出转录水平上调的基因62个,下调的基因24个,A-LPS组筛选出转录水平上调的基因27个,下调的基因29个,两组相同转录差异基因6个;转录差异基因的GO功能注释结果显示,D-LPS组中共显著富集到243个GO term,包括146个生物学过程(BP)、44个细胞组分(CC)、53个生物学功能(MF),且显著富集的生物学过程有ATP生物合成过程、NADH脱氢酶活性和RAGE受体结合等;A-LPS组中共显著富集到167个GO term,包括109个BP、19个CC、39个MF,且显著富集的生物学过程有IL-11受体结合、GTP酶活性、磷脂酶A2活性和尿嘧啶分解代谢过程等;KEGG富集分析结果显示,D-LPS组中的转录差异基因显著富集到氧化磷酸化、产热以及ECM-受体相互作用途径等通路,A-LPS组中的转录差异基因显著富集到Ras信号通路以及泛酸和辅酶A生物合成等通路.从上述两组中随机选取13个转录差异基因进行RT-qPCR验证,结果与测序结果基本一致.本研究首次分析了两种不同血清型Pm LPS刺激羊支气管上皮细胞后转录组测序数据的变化,结果表明两种Pm LPS均主要影响羊支气管上皮细胞免疫、细胞增殖分化、能量产生及代谢等信号通路,为研究LPS在Pm对宿主致病机制中的作用奠定了基础,同时也为PmLPS疫苗的研发提供参考依据.

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分类号 S857.4
栏目名称
DOI 10.3969/j.issn.1008-0589.202111021
发布时间 2022-10-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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中国预防兽医学报

中国预防兽医学报

2022年44卷7期

704-711,717页

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